PCR touchdown manuelle

Programme PCR n°50
Stage 1
95°C X 2min X 1 cycle

Stage 2
92°C X 20"
64°C X 30" X 4 cycles
70°C X 30-60" (ou 1kb/min)

Stage 3
92°C X 20"
61°C X 30" X 4 cycles
70°C X (ou 1kb/min)

Stage 4
92°C X 20"
58°C X 30" X 4 cycles
70°C X (ou 1kb/min)

Stage 5
92°C X 20"
55°C X 30" X 25-35 cycles
70°C X (ou 1kb/min)

Stage 6
70°C X 5min X 1 cycle

Commande d'oligos chez MWG

Aller sur ce site http://www.eurofinsdna.com/
- cliquer sur Shop puis eShop login
- se logger dans login for users, avec mes identifiants bruno.faivre@u-psud.fr, america
- cliquer sur oligonucleotide puis multiple & upload
- remplir le champs avec sa liste de primers sous cette forme
Snu17-112-NcoI GTCCCATGGGCAAAAGGAGTTTACAAAAATACTATGAAGCT
- Dans Scale mettre 0.05µmol
- Dans Purification mettre HPSF
- Puis cliquer sur Save
- Vérifier, puis cliquer sur To Order Basket
- Cliquer sur Order Now
- Pour Shipping Adresse et VAT ID mettre comme ci dessous

- Et mettre Pay by : Purchase Order (receive an invoice)
- Cliquer sur Confirm Order