Préparer le lysis buffer : Concentration finale
- 1X PBS
- 0.2% SDS
- 200 µg/ml proteinase K
- 2 µg/ml RNAseA
- Broyer 3 femelles dans 50µl de lysis buffer puis ajouter 350µl de lysis buffer
- incuber 1h à 50°C
- ajouter 400µl de phenol chlroforme
- vortexer
- centrifuger 20 min à 14000rpm à 4°c
- transférer la phase aqueuese (supérieur) dans 1 nouveau tube
- ajouter un volume isopropanol
- vortexer
- O/N à -80°C
- centrifuger 20 min à 14000rpm 4°C
- jeter le surnageant
- laver le culot avec 2X500µl EtOH 70%
- centrifuger 10 min à 14000rpm 4°C
- 10 min dans la glace
- sécher 15-20 à RT
- reprendre dans 50 µl de H2O
