Régénération billes NiNTA : Lavage modéré :
--> laver la résine avec 0.5M NaOH pendant 30 min
--> éliminer le NaOH avec 10CV H2O
Ensuite 2 options :
Option A : si on utilise la résine tout de suite après, laver avec 10CV de tampon avec 5mM Imidazole
Option B : Si on veut la stocker, laver avec 2CV EtOH 30% puis resuspendre dans 1 volume de EtOH 30%
Régénération billes NiNTA : Lavage Intense : en complément du modéré
--> laver la résine avec 10 CV H2O
--> éliminer le métal avec 10 CV de 100mM EDTA pH 8
--> laver avec 10 CV H2O
--> laver avec 2CV de NiCl2
--> laver avec 10 CV H2O
Ensuite 2 options :
Option A : si on utilise la résine tout de suite après, laver avec 10CV de tampon avec 5mM Imidazole
Option B : Si on veut la stocker, laver avec 2CV EtOH 30% puis resuspendre dans 1 volume de EtOH 30%
De la biologie moléculaire à la biochimie, il y a tous les protocoles nécessaire pour faire de la science.
jeudi 31 octobre 2013
mercredi 14 août 2013
vendredi 12 juillet 2013
mercredi 29 mai 2013
Utilisation des colonnes échangeuses ions
Rappel :
- lorsque le pI > pH = protéine est chargée positivement donc utilisation d'une colonne échangeuse de cations. (mono S), cette colonne a une résine chargée négativement.
- lorsque le pI < pH = proteine est chargée négativement donc utilisation d'une colonne echangeuse d'anions. (monoQ), cette colonne a une résine chargée positivement.
- lorsque le pI > pH = protéine est chargée positivement donc utilisation d'une colonne échangeuse de cations. (mono S), cette colonne a une résine chargée négativement.
- lorsque le pI < pH = proteine est chargée négativement donc utilisation d'une colonne echangeuse d'anions. (monoQ), cette colonne a une résine chargée positivement.
lundi 27 mai 2013
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